文献速递 | 为治疗策略提供新见解！肝脏与巨噬细胞的研究新进展来了→

Kupffer细胞(KCs)位于肝窦，其伪足与肝实质细胞【包括肝星状细胞（HSC）、肝窦内皮细胞（LSEC）、肝细胞等】相互作用，共同形成KCs生态位（niche）。肝实质细胞提供了维持KCs状态（identity）的重要信号，这对KCs的功能至关重要。KCs能从血液中捕获病原体，充当身体的中央细菌过滤器。在肝纤维化过程中，肝细胞死亡和胶原沉积在肝窦周围，极大地改变了血管结构，但KCs如何适应这一变化尚不清楚。

通过体视镜（IVM)和多种小鼠模型【用四氯化碳（CCl₄）制造的肝纤维化小鼠模型、相应基因敲除的小鼠模型等】，并观察肝硬化患者的肝组织情况，可视化并跟踪了KCs在肝纤维化进程中的形态和功能变化及机体如何适应这一改变。

（1）肝纤维化重塑KCs生态位，导致其失能

研究用四氯化碳（CCl₄）制造肝纤维化小鼠模型，可以看到用CCl₄处理8周的小鼠肝脏发生了明显的纤维化和血管变化，KCs与周围实质细胞接触减少，同时下调KCs的表面标记物和一些功能膜蛋白，如CLEC4F、CLEC2、CRIg、TIM-4等，导致KCs功能受损。同时在肝硬化患者的肝脏活检中，也能看到IBA1+肝窦KCs的CRIg缺失。

(2）在纤维化肝脏侧支血管中发现“Kupffer细胞样合胞体（Kupffer cell-like syncytia）”，使纤维化的肝脏仍有一定细菌捕获能力

研究对比了对照组和CCl₄处理组小鼠在静脉注射表达荧光报告基因的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（S. aureus MW2）后的7天生存率，对照组小鼠存活率为100%，而CCl₄处理组小鼠存活率为75-80%。对比通过脂质体或基因敲除KCs缺陷的小鼠组在注射S. aureus MW2后48小时的死亡率为100%和80%，提示CCl₄处理组的小鼠对细菌感染仍具有一定耐受性。同时又发现在CCl₄组小鼠肝脏的侧支新生血管中出现了高表达CRIg的巨噬细胞簇，且它们融合成团，称为 “Kupffer样巨噬细胞簇（Kupffer cell-like macrophage clusters）”，而在不同病因的肝硬化患者肝组织中也发现了类似的CRIg阳性的多核巨噬细胞簇，起增强细菌捕获能力的作用。

（3）Kupffer细胞样合胞体是髓系来源，通过CD44和微生物招募，且依赖于受体CD36进行细胞粘附和融合

虽然该细胞群在功能上类似KC，但它们约90%的合胞体表达单核细胞标记物Ms4a3，提示为髓系来源。通过敲除小鼠相关受体发现，这些细胞主要通过CD44粘附在肝内血管上，且依赖于受体CD36进行细胞粘附和融合。

肝脏纤维化导致KCs生态位被破坏，KCs失去功能。由于在稀薄的血窦中补充KCs几乎没有作用，单核细胞跟随绕过血窦的侧支血管,在那里它们形成KC样的合胞体，有能力从血流中捕获细菌。因此，KCs在改变的纤维化生态位环境中的不适应被形成KC样合胞体来捕获细菌的单核细胞拯救。这些细胞结构可能在进化中发挥关键作用，使哺乳动物能够承受肝脏严重的慢性损伤。

胆汁淤积是指胆汁酸在肝脏中积聚，导致胆管细胞和肝细胞逐渐破坏，肝脏炎症持续存在，即胆汁淤积性肝病（CLD）。胆汁淤积的病因尚不清楚，但疾病的自然病史包括可能发展为纤维化、胆汁性肝硬化、终末期肝病和肿瘤。原发性胆汁性胆管炎（PBC）和原发性硬化性胆管炎（PSC）是两种最常见的CLD，但大约三分之一的PBC患者治疗应答不佳，几乎所有PSC患者的长期预后都很差。迫切需要研究胆汁淤积症的发病机制，以确定新的治疗靶点。

本研究发现Arid3a表达的促炎巨噬细胞可能抑制Mertk介导的对凋亡BECs的识别和结合，从而使胆汁淤积患者的巨噬细胞不能迅速清除凋亡BECs，导致肝损伤。髓系特异性的Arid3a缺失通过减少浸润性巨噬细胞减轻胆汁淤积性肝损伤。Arid3a缺失诱导胞葬作用受体Mertk介导的巨噬细胞更具修复性的表型。Arid3a缺陷巨噬细胞通过上调Mertk增强凋亡胆管细胞的胞葬作用。这一结果揭示了Arid3a导致CLD，并强调Arid3a-Mertk轴在发病机制中的重要性，为CLD的发病机制和治疗策略提供了新的见解。