*本文为“第五届感染病与肝病卓越研究年度论坛非感染性肝病分论坛”正式发言，由第一作者李玉峰和通讯作者李静雅教授共同撰稿。
非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）是指除了酒精及明确的肝脏损伤因素以外，所导致的以肝脏组织内脂质过度沉积为主要特征的临床病理综合征。近几十年来，随着人们生活水平的提高及饮食习惯的改变，肥胖、高脂血症、糖尿病等代谢综合征呈现全球化的趋势， NAFLD作为代谢综合征在肝脏的集中体现，也呈现全球高度流行，是多种慢性肝病的重要病因。据报道，NAFLD全球患病率高达25%，是全球患病人数最多的肝脏慢性疾病。值得注意的是，流行病学研究发现我国已经成为世界上非酒精性脂肪肝患病人数最多而且患病人数增长最快的国家，NAFLD相关的肝硬化、肝癌等晚期肝病发病率及死亡率也将大幅度增加，是重大健康威胁。然而，目前临床上仍没有任何一种药物被正式批准用于NAFLD的治疗，其治疗策略及干预手段仍是临床亟需解决的热点问题。
NAFLD发病机理复杂，肝脂质代谢紊乱是其病理进程发生发展的关键机制与先决条件，作为细胞的“能量”工厂及三大营养物质的主要代谢场所，线粒体损伤首当其冲。线粒体稳态平衡，包括线粒体的生物合成、线粒体自噬以及线粒体动态变化等关键环节，是维持线粒体功能发挥的重要调节机制，对于细胞能量代谢平衡及信号通路调控起决定性作用，其稳态失衡是NAFLD/NASH、肥胖等代谢性疾病的关键病理原因。靶向线粒体稳态平衡有望为NAFLD疾病治疗提供有效的干预策略，具有重要的研究价值。然而NAFLD病理机制复杂，线粒体稳态失衡在其中的具体机制及作用途径有待进一步研究。死亡相关凋亡诱导蛋白激酶DRAK2，属于死亡相关蛋白激酶DAPK家族，分别是DAPK1，DAPK2，DAPK3，DRAK1和DRAK2，均是细胞凋亡的正性调节因子。Mao J等发现DRAK2在高脂饮食诱导的小鼠胰腺中高表达，且胰腺中DRAK2的高表达与胰岛细胞的凋亡密切相关。最近一项研究发现DRAK2高表达于肝癌患者的肝组织，且其表达水平与病人预后存活率密切相关。作者前期研究发现高脂、高脂高果糖饮食诱导小鼠、ob/ob及db/db疾病模型小鼠等多种NAFLD/NASH模型小鼠的肝脏组织中DRAK2蛋白水平均显著增加，提示DRAK2在NAFLD/NASH病理中的作用。接下来，作者利用AAV病毒构建肝脏DRAK2敲低及过转小鼠，并通过高脂饮食诱导，结果表明敲低肝脏DRAK2显著抑制NAFLD/NASH进展，而过表达则可促进其病理改变。进一步构建肝脏DRAK2特异性敲除小鼠，分别通过高脂、高脂高果糖饮食诱导NAFLD及NASH疾病模型，发现Drak2-HKO小鼠能够显著缓解NAFLD/NASH病理进程的发生发展。机制上，作者通过定量磷酸化修饰组学与Co-IP-MS的蛋白质组学质谱研究手段，发现DRAK2与剪接因子SRSF6直接相互作用，并最终调节其下游靶基因的RNA可变剪接事件。利用转录组学测序及RNA可变剪接外显子分析，通过数据库定位分析，作者发现其中占比20%的剪接事件与线粒体功能基因密切相关。进而，选取了mtDNA聚合酶POLγ2的编码基因Polg2进行验证，结果表明Polg2的病理剪接形式可显著降低mtDNA复制效率、损伤线粒体功能。最后，作者利用已报道的DRAK2小分子抑制剂22b探究其对NAFLD/NASH的药理性干预作用，发现DRAK2小分子抑制剂22b能够影响DRAK2-SRSF6信号通路保护线粒体的功能进而缓解NAFLD/NASH的病理进程，进一步论证了NAFLD/NASH病理进程中DRAK2-SRSF6这一全新分子机制，并提示其作为新靶向策略干预非酒精性脂肪肝炎的可行性。该项研究首次发现NAFLD/NASH病理进程中线粒体功能相关蛋白的RNA选择性剪接失调，揭示了非酒精性脂肪肝病理形成中的线粒体稳态失衡分子机制，为NASH的创新药物研发提供原始创新药物靶标以及可能的干预手段，具有重要的转化价值与临床意义。然而NASH病理机制复杂且人、鼠种属高异质性，极大的阻碍了其治疗策略的发现与药物研发，且基于RNA可变剪接调节机制的复杂性及人、鼠种属间差异性，DRAK2介导的下游相互作用SR蛋白及识别的RNA序列也必然存在差异性。那么人肝脏中DRAK2是通过何种SR蛋白来执行RNA识别与病理性剪接形式的加工，是DRAK2介导病理机制的临床转化的关键科学问题。作者通过免疫组化实验发现，在NAFLD/NASH病人的肝病理组织中DRAK2 蛋白的表达水平也显著增加，且其表达水平与病人NAS评分呈正相关，初步论证了DRAK2与NAFLD/NASH临床病理之间的相关性。并利用人源DRAK2蛋白建立了相互作用蛋白数据库，功能富集发现RNA可变剪接信号通路显著富集，表明在人肝脏中DRAK2也参与了RNA可变剪接过程的调节。因此，作者接下来利用RNA Seq组学及可变剪接外显子分析临床肝病理样本的RNA可变剪接种属差异。比较正常肝脏组织与肝脏病理组织，有10%-20%的线粒体功能相关基因的RNA可变剪接发生了病理性的改变，且人与小鼠之间并没有变化一致的剪接事件。因此，在前期研究的基础上，作者接下来将开展研究深入探讨DRAK2介导的人肝组织可变剪接关键病理复合物组成以及病理信号分子，并论证DRAK2介导的线粒体稳态作为NAFLD/NASH药物发现的原创靶标的可行性，建立分子水平、细胞水平及动物水平小分子实体的发现及评价模型，以期为NAFLD/NASH疾病的治疗提供全新的靶向策略与干预手段。
中国科学院上海药物研究所研究员，博士研究生导师。2003年毕业于中国科学院上海药物研究所获博士学位，2008年始任研究员，2018年11月任研究组长。致力于营养、环境等因素所致代谢性疾病的病理机制和治疗策略研究，围绕“代谢性疾病中的线粒体稳态失衡”这一关键科学问题，开展新病理机制、新靶标论证和新分子实体发现等研究。近五年来以最后通讯作者于Cell Metabolism、Acta Pharmaceutica Sinica B、Kidney International、Diabetes、Cell Death & Disease等刊物发表学术论文18篇。基于线粒体稳态调控，发现多个候选新药，其中家族性高胆固醇血症候选药物BGT-002获批临床试验（批准号2022LP00213）。相关应用研究成果申请国内外发明专利11项，已获授权发明专利4项。主持国家自然科学基金重大研究计划、科技部“重大新药创制”科技重大专项子课题、中国科学院战略性先导科技专项A类子课题，入选上海市青年科技启明星和上海市人才发展计划。
NAFLD/NASH的病理机制复杂多因，该项研究创新性揭示了SRSF6介导线粒体功能相关蛋白基因选择性剪接失调是线粒体稳态失衡的重要分子机制，并将其与NAFLD/NASH临床病理进程联系在一起，揭示了NAFLD/NASH 临床病理形成中的线粒体稳态失衡以及新调节模式。该项针对线粒体稳态调节的概念性创新研究，不仅仅为NASH的药物研发提供原始创新药物靶标，同时也为线粒体稳态失衡相关疾病如神经退行性疾病等的临床病理机制与药物研发提供了新思路与研究范式，不过该项研究的创新病理机制亟需进一步的临床转化研究，将有望发现全新的治疗NAFLD/NASH原创候选药物。